新型肝癌组织的体外三维培养模型

目的:利用肝癌组织进行体外的三维（three-dimension，3D）组织块培养，通过添加PD98059和霍乱毒素（cholera toxin，CT）优化培养条件，建立一种高活性的肝癌组织体外培养模型。方法:收集中山大学肿瘤防治中心肝胆科的肝癌组织标本，经清洗、冻存、复苏等处理后分为对照组、PD组、CT组、PD+CT组，同时进行体外的二维（two-dimension，2D）和三维培养。各组组织采用DNA断裂的原位末端标记法（TUNEL）检测组织细胞凋亡情况，qRT-PCR检测BCL-2、BID、Caspase 3、Cyclin D1、CDK2、ELK-1、C-FOS、C-MYC、C-JUN等相关基因的mRNA表达水平，免疫荧光染色检测BCL-2和cleaved caspase-3蛋白表达情况，筛选并确定最优的体外培养方法。结果:3D培养组的组织细胞凋亡均少于2D培养组；PD98059通过上调BCL-2蛋白的表达，下调cleaved caspase-3蛋白的表达，激活MEK/ERK下游基因，从而减少体外培养的组织细胞凋亡，增强其抗凋亡能力；霍乱毒素通过上调Cyclin D1、CDK2的基因表达，促进其增殖。结论:我们开发了一种新型肝癌组织的体外三维培养模型，它可以作为进一步的药物试验和人源性异种移植(PDX)模型的工具。     

基于网络药理学和分子对接技术芩苏胶囊干预新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在药效物质预测分析

目的运用网络药理学和分子对接技术探究芩苏胶囊防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在药效物质。方法采用中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索出芩苏胶囊中4味药材(黄芩、紫苏子、苦参和丹参)所含有效成分与作用靶点;通过UniProt、GeneCards和OMIM数据库,筛选出COVID-19相关靶点,得到与芩苏胶囊有效成分作用的共同靶点,采用String数据库构建PPI网络;借助Cytoscape3.7.2构建"中药-化合物-靶点"网络;运用DAVID数据库对相关靶点进行GO功能和KEGG通路的富集分析;通过分子对接技术评价"中药-成分-靶点"网络中核心成分与COVID-19的3CL水解酶及血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)的结合作用。结果芩苏胶囊"中药-成分-靶点"网络121个化合物和274个相关靶点,包含14个核心化合物和33个核心靶点。GO功能富集分析得到527个条目,主要涉及药物应答、炎症反应、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控等。KEGG路富集共得到111条信号通路,筛选得到20条信号通路,涉及乙型肝炎、甲型流感、肺结核等与病毒感染相关的通路。分子对接表明,芩苏胶囊中14个核心成分与COVID-19的3CL水解酶和ACE2的亲和作用较好。质谱指认出芩苏胶囊中5个成分可能是防治COVID-19的核心成分。黄芩素、汉黄芩素、隐丹参酮、丹参酮ⅡA和木犀草素是芩苏胶囊治疗COVID-19的核心药效物质。结论芩苏胶囊可能通过多成分结合SARS-CoV-2 3CL水解酶及ACE2作用于IL-6、TNF和TP53等关键靶点调节多条信号通路,从而对COVID-19起到治疗作用。     

丝穗金粟兰化学成分研究

目的对丝穗金粟兰Chloranthus fortunei的化学成分进行研究。方法利用多种色谱分离方法和波谱学鉴定方法对丝穗金粟兰中的化学成分进行了分离鉴定,并借助MTT法对其中得到的部分化合物进行了抗肿瘤活性的初步筛选。结果从丝穗金粟兰95%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为迷迭香酸(1)、2′-羟基-4,3′,4′,6′-四甲氧基查耳酮(2)、卡瓦胡椒素A(3)、cycloshizukaol A(4)、白术内酯III(5)、4β-hydroxy-8,12-epoxyeudesma-7,11-diene-1,6-dione(6)、(8α)-6,8-dihydroxycadina-7(11),10(15)-dien-12-oic acidγ-lactone(7)、curcolonol(8)、11-hydroxyldrim-8,12-en-14-oic acid(9)、木栓酮(10)、异香草酸(11)、6β-hydroxystigmast-4-en-3-one(12)、3,4-二羟基苯甲酸(13)、莽草酸(14)、东莨菪苷(15)以及N-acetyltyramine 1-O-β-D-glucoside(16)。化合物4和5表现出微弱的细胞毒作用,半数抑制浓度(IC50)值在46～85μmol/L。结论化合物2、10、11、13～15为首次从金粟兰属植物中获得,化合物1～3、6～16为首次从丝穗金粟兰中分离得到。丝穗金粟兰中部分倍半萜显示出弱的抗肿瘤活性。     

关于医学硕士研究生科研写作能力的培养思考

随着国家社会经济的高速发展,各领域都需要更多高层次拔尖创新性人才。我国医药卫生事业的快速、稳定发展将会直接关系国民生命的健康,这就需要培养大量硕士研究生及以上的医学高层次人才。目前,医学硕士研究生还存在着科研能力不足的现状,而科研写作是科研水平和科研质量的呈现,是增强沟通、提高创新性的必然媒介。就如何培养提高医学硕士研究生写作能力内外部影响因素进行了阐述,并提出了改善方法。     

810例妊娠期妇女碘缺乏现状及影响因素分析

目的 分析妊娠期妇女碘缺乏现状及影响因素,为妊娠期妇女碘缺乏的控制提供参考依据。方法 选取2017年3月—2018年2月期间天台县人民医院的810例妊娠期妇女为研究对象,采用砷铈催化分光光度法进行妊娠期妇女尿碘检测,分析不同特征孕妇的碘缺乏发生情况,并采用多因素logistic回归分析影响妊娠期孕产妇碘缺乏的因素。结果810例妊娠期妇女的碘缺乏发生率为30.86%,不同年龄碘缺乏发生率比较,差异无统计学意义(χ²=0.019,P＞0.05);而不同妊娠史、文化程度、居住地、早孕反应程度、妊娠期合并症、职业、社会支持程度及高碘饮食频率者的碘缺乏发生率比较,差异有统计学意义(均P＜0.05)。多因素logistic回归分析显示,初次妊娠(OR=2.415)、文化程度中专及以下(OR=2.647)、居住地为农村(OR=2.529)、早孕反应严重(OR=2.695)、妊娠期有合并症(OR=2.507)、职业为非医学职业(OR=3.042)、社会支持程度较低(OR=2.831)及高碘饮食频率<1次/周(OR=2.585)是妊娠期孕产妇碘缺乏的危险因素。结论 天台县妊娠期妇女的碘缺乏较为突出,且影响因素较多,因此应加强健康教育,同时指导碘补充方法,以控制妊娠期碘缺乏的发生。     

电针对肠易激综合征内脏痛大鼠β内啡肽及脑啡肽的调节作用

目的：观察电针对肠易激综合征(IBS)内脏痛大鼠血清及下丘脑β-内啡肽（β-EP）及脑啡肽（ENK）的调节作用，探讨电针对IBS内脏痛的镇痛效应。方法：制备IBS内脏痛大鼠模型。实验分为模型组、电针组、假电针组和正常组。取天枢和上巨虚穴（双侧）为针刺穴位，针刺后连接电针仪；假电针组进针透皮即止，连接电针仪但不通电。模型组和正常组做与电针组相同的固定，不进行任何治疗。治疗后测试各组大鼠AWR评分，检测血清及下丘脑β-EP及ENK水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠AWR评分在各个压力梯度下均显著升高、血清β-EP及ENK水平显著降低，差异有统计学意义（P<0.05），下丘脑β-EP、ENK水平差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组、假电针组比较，电针组大鼠AWR评分明显降低，差异有统计学意义（P<0.05）；血清和下丘脑β-EP、ENK水平显著增高，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，假电针组大鼠AWR评分、血清和下丘脑β-EP、ENK水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论：电针有效缓解IBS大鼠内脏痛，其作用机制可能与调节血清和下丘脑β-EP、ENK的水平有关。     

知母饮片炮制前后黄酮类和皂苷类成分变化研究

目的:测定知母饮片炮制前后3个黄酮类和2个皂苷类成分变化。方法:采用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定3个黄酮类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量20μL,流速1.0 mL/min,柱温30℃;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定2个皂苷类成分,色谱柱为岛津Intetsil ODS-3(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%冰醋酸,梯度洗脱,进样量10μL,流速1.0 mL/min,氮气流量2.5 mL/min,蒸发温度80℃。结果:知母饮片炮制后知母皂苷BⅡ、新芒果苷、芒果苷含量下降,知母皂苷AⅢ含量上升,异芒果苷含量相对稳定。结论:知母饮片炮制后部分知母皂苷BⅡ会转化成知母皂苷AⅢ,新芒果苷、芒果苷会转化成其他成分,异芒果苷结构相对稳定,不易转化成其他成分。